前言

青光眼(glaucoma)是一類非常復雜的眼病，有關(guān)青光眼的發(fā)生機制、發(fā)展過程以及有效治療手段等諸多方面的問題仍在探討之中，因此，對青光眼的病理、生理、解剖、遺傳、藥理等的研究需要廣泛地進行動物實驗。

青光眼是一組以視神經(jīng)凹陷性萎縮和視野缺損為特征的疾病。眼壓升高是目前公認的青光眼主要危險因素。臨床上是以降低眼壓作為治療青光眼的主要手段。青光眼發(fā)病機制和治療的研究進展緩慢，其主要原因之一即為缺乏理想的動物模型。因此，建立一種能夠模擬人類青光眼視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞和視神經(jīng)病變的動物模型十分重要。

部分造模方法

使用動物：小鼠

【造模機制】：

采用各種手段破壞房水回流通路，便可引發(fā)眼壓增高，進一步引起視神經(jīng)變性以及視神經(jīng)節(jié)細胞凋亡和缺失。使用的手段目前常用的有：①向前房注射微小顆?；鞈乙夯蝠こ硪阂鹦×航M織房水回流通路的堵塞；②電凝鞏膜表面至少三組靜脈以及角膜緣周圍血管，致使眼壓升高；③使用激光造成小梁組織的變性，引起房水回流障礙，從而致使眼壓升高。

【造模方法】：

1.小鼠 選用6~10周小鼠。采用腹腔內(nèi)注射進行全身麻醉后加上眼表局部麻醉小鼠，用PBS混懸聚苯乙烯微球(Φµm)，最終濃度為每毫升混懸體含7.2×10⁶個微球，然后進行小鼠單眼前房注射入大約2µ1微球，并于注射后第23天重復注射一次。每次注射完用裂隙燈觀察前房和虹膜是否清晰，有無角膜水腫和滲出現(xiàn)象。在第一次注射后每2天用眼壓計測量小鼠雙眼眼壓。每只小鼠每眼測量出6個讀數(shù)，取平均值作為當天眼壓值。在第一次注射后2天內(nèi)可以導致眼壓升高50％以上，并一直維持約56天。除眼壓升高外，最終引起視神經(jīng)軸突和節(jié)細胞(RGC)丟失40％左右。

2.大鼠和家兔 選用6~10周齡動物。將動物放在安靜、避免強光的環(huán)境中靜養(yǎng)1周再進行手術(shù)。手術(shù)方法：用3％戊巴比妥鈉按25-30mg/kg行腹腔注射麻醉。待麻醉顯效后，將動物固定于手術(shù)臺上。行單側(cè)眼手術(shù)造模。術(shù)眼滴0.5％丁卡因眼液，沿角膜緣剪開球結(jié)膜270°，分離并暴露鞏膜表面靜脈，用水下電凝器電凝鞏膜表面至少三組靜脈以及角膜緣周圍血管，直至血管組織發(fā)白，復位球結(jié)膜。假手術(shù)對照只剪開球結(jié)膜，未進行鞏膜表面靜脈以及角膜緣周圍血管電凝。術(shù)眼涂抗菌眼膏。術(shù)畢將動物置放于室溫下，待其自然蘇醒。術(shù)后5天每日抗菌眼液滴眼3次及抗菌眼膏涂眼1次。眼壓測定：分別測定術(shù)前和術(shù)后第1、2、3、4及8周高眼壓組和假手術(shù)對照組兩組大鼠動物的雙眼壓。方法是：用3％戊巴比妥鈉按25~30mg/kg行腹腔注射，待麻醉顯效后，雙眼滴0.5％的丁卡因眼液，用眼壓計測量眼壓，每眼記錄3~5次讀數(shù)。眼壓計剛接觸角膜或剛離開角膜的任何讀數(shù)因其不可靠均棄去不要。

3.獼猴模型 選用健康成年獼猴，雌雄不限，制模前先檢查動物眼部情況，必須有開的房角、正常的視乳頭以及正常的眼壓。肌內(nèi)注射氯胺酮(5mg/kg)麻醉，結(jié)膜囊滴0.5％丁卡因3次，用氬離子激光器（配以房角鏡），對準小梁網(wǎng)中1/3部，以1.2~1.5W的能量，光斑直徑50µm，時間0.5秒，在360°范圍光凝100點，術(shù)后前3~5天用1％醋酸潑尼松龍（或相應(yīng)的抗炎劑），減少術(shù)后反應(yīng)。

【模型特點】：

1.小鼠模型效果較好，不會導致明顯的眼球結(jié)構(gòu)損傷和炎癥反應(yīng)，高眼壓維持的時間較長，能誘發(fā)視神經(jīng)軸突變性和節(jié)細胞丟失。

2.大鼠和兔模型術(shù)后1、2、3、4及8周，高眼壓眼的眼壓與術(shù)前基壓、對側(cè)未手術(shù)眼及假手術(shù)組眼壓比較，差異明顯，有統(tǒng)計學意義。術(shù)后1周后眼壓基本穩(wěn)定，大鼠為4.1~6.8kPa(30.12~51.18mmHg)。通過電凝鞏膜表面至少3組靜脈及角膜周圍血管，減少房水靜脈回流，眼壓升高明顯且持久。術(shù)眼炎癥反應(yīng)較輕。

3.猴子模型的特征是激光光凝后，眼壓有短暫急劇下降、房水流量減少的現(xiàn)象。其原因可能是炎性反應(yīng)、睫狀突受損所致。造模時需多次激光光凝以提高模型的成功率。

【模型評估和應(yīng)用】：

該模型病理改變部位主要在小梁網(wǎng)組織，有可能造成周邊虹膜前粘連，最終是阻塞房水外流，引起眼壓較長時間增高、視神經(jīng)軸突變性和節(jié)細胞凋亡缺失，比較符合開角型青光眼的病理改變。

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